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An efficient and robust strategy for developing cell lines through targeted integration
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AI
DOI：10.1002/btpr.88509.png)
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摘要
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降低细胞系开发所需时间并提高结果可预测性是持续改进的重点。靶向整合（TI）是一种将生物制剂表达盒插入预定位点（即着陆位点）的策略，用于此目的。为使着陆位点宿主细胞具有商业可行性，必须支持高滴度，且着陆位点中的转基因必须高效转录。构建此类宿主TI细胞系需要大量时间和精力，且成功率较低。本文介绍了一种策略，我们将一种稳定高表达mAb细胞系进行转化，并生成了多个具有商业相关性的TI宿主细胞系。我们使用符合平台的流程常规生成6 g/L mAb克隆，并通过工艺优化达到8至>10 g/L，且这些克隆在表型和遗传上稳定。我们还创建了一种双着陆位点，其中两个着陆位点位于同一位置。这为简化差异化表达基因的构建提供了机会，因为两个着陆位点预计表现一致。
Keyword:
MEDIATED CASSETTE EXCHANGE
SITE-SPECIFIC INTEGRATION
GENE INTEGRATION
ANTIBODY EXPRESSION
GENOMIC INTEGRATION
MAMMALIAN-CELLS
SLEEPING-BEAUTY
RECOMBINATION
TRANSPOSON
SYSTEM
期刊
IF:
2.5
论文数:
184
被引数:
7.4K
机构
引用论文
Targeted integration in human cells through single crossover mediated by ZFN or CRISPR/Cas9.png)
BMC BIOTECHNOLOGY
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BMC BIOTECHNOLOGYIF3.4
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'GM-gene-deletor':: fused loxP-FRT recognition sequences dramatically improve the efficiency of FLP or CRE recombinase on transgene excision from pollen and seed of tobacco plants'Gm-gene-deletor':: 融合的loxp-frt识别序列显着提高了FLP或CRE重组酶从烟草植物的花粉和种子中切除转基因的效率OAAI
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