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Macromolecular High-Affinity Binding Probed by Advanced Fluorescence Techniques
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DOI：10.1002/cbic.202500283.png)
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摘要
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由于荧光技术的极端灵敏度和固有选择性，高亲和力结合甚至可以在皮摩尔范围内的极低分子浓度下进行测量。特别是，近年来，结合荧光显微镜的现代先进技术已经取得了相当大的方法学进展。本文简要介绍了荧光检测的基本物理原理及其实验测量方案。对于溶液中的相互作用生物分子，共聚焦荧光显微镜能够采用一些非常有效的方法来表征复杂样品环境中的结合作用，并实现小样品消耗。除了在经典光谱仪中使用体样品的标准技术外，还介绍了单分子Förster共振能量转移、双色符合检测和荧光相关光谱的应用。更先进技术的优势在于其广泛适用性，范围从用于活细胞的基于荧光的遗传编码生物传感器，到在极低分子浓度下测量结合曲线的高可控性。本文比较了各种技术的优缺点，并讨论了近期最先进的应用。
Keyword:
biosensors
fluorescence spectroscopy
FRET
protein-protein interactions
single-molecule studies
AI总结
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期刊
IF:
2.8
论文数:
943
被引数:
1.5W
机构
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