.png){kind=icon}
返回
Thio-Modification Effects on mRNA Translation Using a PureCap-Based Capping Method
.png){kind=icon}
OA
AI
DOI：10.1039/D6CB00047A.png)
.png){kind=icon}
原文求助.png){kind=icon}
分享.png){kind=icon}
收藏
摘要
En 中文
控制翻译效率、稳定性和固有免疫识别仍然是mRNA疗法实际应用中的关键挑战，而核苷酸化学修饰被广泛用作解决这些问题的有效策略。糖修饰（如4′-硫代取代）和磷酸骨架修饰（如磷硫酰酯（PS）取代）可改变核酸行为。本研究中，为在mRNA 5′端+1和+2核苷酸引入4′-硫代取代和PS取代，我们基于先前建立的PureCap方法合成了一系列帽状结构类似物，该方法可制备高纯度帽化mRNA，以可靠评估帽结构修饰的影响。使用所得帽状类似物，通过体外转录（IVT）并经高效液相色谱（HPLC）纯化制备mRNA，即使在核糖基上引入修饰，IVT产量也未显著降低。在培养的HeLa细胞中，对于Cap 0、Cap 1和Cap 2结构，PS修饰的mRNA比4′-硫代修饰的对应物表现出更高的蛋白质表达。相反，对于Cap 2结构，带有4′-硫代或PS修饰的PureCap衍生mRNA在细胞翻译测定72小时及皮下给药后各时间点，其蛋白质表达与使用商业化CleanCap AG制备的N1-甲基假尿嘧啶（m1Ψ）修饰对照mRNA相当。综合来看，这些结果表明5′末端+1和+2核苷酸处的4′-硫代和PS修饰可改变mRNA功能。本研究进一步证明了PureCap平台的实用性，并强调了其在mRNA疗法开发中的广泛应用前景。
