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DOI：10.1038/s41596-026-01399-x.png)
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摘要
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十年前，引入膨胀显微技术（ExM）标志着超分辨率成像领域的一次变革，通过物理分离荧光团绕过衍射极限。此后，多项ExM技术的改进扩展了该方法的应用范围，但分子尺度分辨率仍无法实现。我们近期开发了一步纳米级ExM技术，将ExM与基于涨落的超分辨率分析相结合，能够在常规荧光显微镜下直接可视化单个蛋白质的形状，这一能力此前仅限于冷冻电子显微镜和基于平均的技术。本文提供了凝胶包埋、标记、膨胀、图像采集和数据分析的详细步骤，并介绍了一个稳定且用户友好的软件包用于高效涨落分析。尽管一步纳米级ExM适用于多种样品，包括纯化蛋白质、细胞和组织，但其最显著的贡献在于使单蛋白质形状分析变得可及且可重复。总体而言，我们为常规设备上的蛋白质成像提供了一个实用框架。一种将膨胀显微技术与基于涨落的超分辨率分析相结合的方法，使通过常规荧光显微镜可视化单个蛋白质成为可能。
期刊
IF:
16
论文数:
4.0K
被引数:
5.6W
机构
引用论文
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